洗脫率與吸附劑、洗脫溶劑、保留體積、流速等因素都有關,一般可達90%~98%。
相關資料:
1、固相萃取柱(英文,簡稱SPEcolumn,或SolidPhaseextractionCartridges,簡稱SPEcartridges)是從層析柱發展而來的一種用于萃取、分離、濃縮的樣品前處理裝置。
2、原理:固相萃取(SolidPhaseExtraction,SPE)技術基于液相色譜原理,可近似看作一個簡單的色譜過程。原理是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標化合物吸附,與樣品的基體和干擾化合物分離,然后再用洗脫液洗脫或加熱解吸附,達到分離和富集目標化合物的目的。固相萃取可分為在線萃取和離線萃取。前者萃取與色譜分析同步完成,而后者萃取與色譜分析分步完成,兩者在原理上是一致的。
3、固相萃取柱的使用
固相萃取可以通過手工方式完成,即在固相萃取柱上端連接一個注射器,通過對注射器的擠壓將萃取柱內的液體排擠出萃取柱。另外,也可以使用正壓或負壓固相萃取裝置對批量樣品進行固相萃取操作。隨著科技的發展和樣品數量的增多,越來越多的分析實驗室開始使用自動固相萃取儀,特別是多通道固相萃取儀對批量樣品進行處理。
4、萃取步驟
1.柱預處理(柱活化)
用適當的溶劑淋洗SPE柱,以使吸附劑保持濕潤,可以吸附目標化合物或干擾化合物。不同模式固相萃取小柱活化用的溶劑不同,其目的有2個:一是除去填料中可能存在的雜質;二是使填料溶劑化,提高固相萃取的重現性。
2.上樣
將液態或溶解后的固態樣品倒入預處理后的SPE柱,然后利用抽真空、加壓或離心的方法使樣品通過SPE柱,在該步驟中,分析物被保留在吸附劑上。
3.淋洗和洗脫
樣品進入SPE柱、目標化合物被吸附后,視分離模式和樣品性質而定,可采用適當的洗脫劑將目標化合物直接淋洗下來;也可先將干擾化合物淋洗掉,再用適當的洗脫劑將目標化合物洗脫,通常采用后一種方法更有利于樣品的凈化。淋洗和洗脫同上所述,可采用抽真空、加壓或離心的方法使淋洗液或洗脫液流過吸附劑。
5、影響因素
1)吸附劑
目前常用的吸附劑有正、反相吸附劑、離子交換吸附劑和抗體鍵合吸附劑等,試驗時盡量選擇與目標化合物極性相似的吸附劑,其用量大小與目標物性質(極性、揮發性)及其在水樣中的濃度直接相關。
2)洗脫溶劑
在SPE中,洗脫溶劑的選擇與目標物性質及使用的吸附劑有關,樓蔓藤等給出了常見有機溶劑的極性和洗脫強度,試驗過程中可根劇被測物的物理、化學性質選用。洗脫劑體積應以淋洗*為前提,體積最小的為最佳,可通過多次洗脫法(小體積),根據回收率的變化曲線找到最佳的洗脫液體積,顯然,洗脫體積越小富集倍數越高。
3)保留體積
在加樣過程中,保留體積是SPE技術的關鍵因素之一,它代表了進行痕量富集時能有效處理的水樣體積。根據色譜分析儀的最小檢出量和水樣中有機物的濃度,可以估算出欲富集的最小水樣體積。另外,樣液的pH值也影響樣品的吸附效率。
4)流速
流速的控制對SPE至關重要,流速過大將引起SPE柱的穿漏,流速太小則處理速度太慢。柱預處理過程中流速適中,保證溶液充分濕潤吸附劑即可,上樣和洗脫過程則要求流速盡量慢些,以使分析物盡量保留在柱內或達到*洗脫,否則會導致分析物流失,影響回收率的大小。尤其離子交換過程,進行比較緩慢,應采用較低的流速(0.5~2.0mL/min)。